PERFIL DE ALCALOIDES QUINOLIZIDÍNICOS EN PLANTA Y CULTIVOS in vitro DE lupinus ASCHENBORNII SHAUER).

Abstract

El objetivo del presente trabajo fue comparar la producción de AQ en plantas y cultivos in vitro de Lupinus aschenbornii Shauer. Para inducir callo se inocularon explantes de hipocótilo, cotiledón y raíz de L. aschenbornii en medio semisólido Murashige- Skoog suplementado con sacarosa, y se evaluaron 12 combinaciones de fitorreguladores: cinetina y ácido 2,4- diclorofenoxiacético (2,4-D) a concentraciones entre 0 a 2 mg/L. Se determinó el porcentaje de inducción de callo (IC) y se evaluó el crecimiento de los cultivos de callo (peso fresco). Los resultados obtenidos muestran que los mejores porcentajes de IC para hipocótilo fueron con las combinaciones 1mg/L de cinetina y 0.5 mg/L de 2,4-D, 2mg/L de cinetina y 0.5 mg/L de 2,4-D (100%, 99%, respectivamente), para raíz con combinaciones 0.5 mg/L de cinetina y 0.5 mg/L de 2,4-D, y 0.5 mg/L de cinetina y 1 mg/L de 2,4-D (96% y 94%, respectivamente). Cotiledón presentó porcentajes de IC menores (69% y 61%). La cinética de crecimiento de callos provenientes de hipocótilo de L. aschenbornii mostró una fase lag (0- 7 d), una fase exponencial (7- 20 d), estacionaria (20- 26 d) y una fase de muerte celular (a partir del día 35) con una tasa de crecimiento especifica de 0.1206 d-1 y Td de 5.74 d. El cultivo alcanzó una biomasa maxima de 4.6 gPF/L en el día 20. Se establecieron cultivos en suspensión a partir de callos de hipocótilo tomados de la fase exponencial, presentando dos fenotipos, verde y café. A través de cromatografía de gases acoplada a masas se determinaron la concentración y el perfil de AQ en órganos (semilla, flor, tallo, hoja, vaina y raíz) y en cultivos in vitro (callo, suspensión, medio de cultivo). La concentración de AQ en cultivos in vitro es dos y tres órdenes de magnitud menor que lo presentado en órganos de la planta silvestre. Los perfiles de AQ de cultivos in vitro son diferentes a los de la planta silvestre, observándose una mayor diversidad de esteres de AQ en estos.