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Título : Caracterización de la respuesta inmune de la almeja mano de león Nodipecten subnodosus (Sowerby, 1835) (Pectinidae)
Autor : Arellano Martínez, Marcial
Ramírez Castillo, Erick Ramsés
Palabras clave : Almeja mano de león
Cultivo
Bacteriología
Fecha de publicación : 2005
Editorial : Instituto Politécnico Nacional. Centro Interdisciplinario de Ciencias Marinas
Citación : Ramírez Castillo, E.R., 2005. Caracterización de la respuesta inmune de la almeja mano de león Nodipecten subnodosus (Sowerby, 1835) (Pectinidae). Maestría en Manejo de Recursos Marinos Thesis, Instituto Politécnico Nacional. Centro Interdisciplinario de Ciencias Marinas, La Paz, B. C. S., México, ix, 76 h.
Resumen : En moluscos bivalvos, el efecto hidrolitico de las enzimas Iisosomales es uno de los mecanismos más importantes en la degradación de organismos patógenos dentro o fuera de los hemocitos. Por lo tanto, la actividad enzimática en la hemolinfa se ha estudiado ampliamente como indicador de la capacidad inmune en muchas especies de bivalvos. El objetivo de este trabajo fue caracterizar la respuesta inmune de la almeja mano de león Nodipecten subnodosus mediante el estudio de las enzimas Iisosomales al ser retada con Vibrio alginolyticus. Primero se determinó la dosis subletal de V. alginolyticus, usando 5 lotes de 8 organismos cada uno y probando 5 concentraciones (102, 103, 104, 105, 106 UFC.mL-1) durante un período de 10 días. Otro lote sirvió como control, inyectando solución salina a las almejas. Para analizar la respuesta inmune, 5 lotes de 6 almejas cada uno, fueron inyectados con la dosis subletal (1 x 105 UFC.mL-1); 4 organismos por cada tratamiento sirvieron como control. Después de 6 y 24 h y 3, 6 y 10 d se obtuvieron muestras de hemolinfa (6 mL) del músculo aductor usando una jeringa estéril de 5 mL. En cada caso, los hemocitos fueron cuantificados (hemocitos/mL) con un hematocitómetro y se obtuvo el diámetro y área de los mismos. Por otra parte, se separaron los hemocitos del plasma por centrifugación (500 x g/10 min/4 OC). Después, los hemocitos se rompieron por congelamiento-descongelamiento para obtener el sobrenadante de lisado de hemocitos (SLH). Las enzimas hidrolíticas fueron determinadas en plasma y SLH con el kit API ZYM (BioMérieux) y Iisoplacas. La actividad enzimática fue reportada en relación con la concentración proteica de la muestras. Se realizó un análisis histológico en glándula digestiva, músculo, gónada, branquia y manto para verificar un posible daño en estos tejidos y se analizó la variación en la composición bioquímica de la hemolinfa. La cantidad de hemocitos fue significativamente menor (ANDEVA, P=0.03) 6 h después del reto, mientras que los hemocitos fueron significativamente más grandes (ANDEVA, P=0.01). De las 19 enzimas que detecta el kit API ZYM, solamente se encontraron 11 en SLH y 6 en plasma. La actividad enzimática fue significativamente mayor (ANDEVA, P=O.OOO) en hemocitos que en plasma. Las enzimas de mayor actividad fueron leucil arilamidasa y esterasa, tanto en plasma como en SLH. La actividad de la lisozima no mostró diferencias significativas (ANDEVA, P=0.05) entre los tiempos de muestreo, aunque en plasma las concentraciones fueron significativamente mayores (ANDEVA, P=0.041) que en SLH. Con la dosis subletal las almejas presentaron cantidades más bajas de hemocitos a las 6 h, 3d, y 6 d. Esto pudo deberse a su lisis, degranulación y/o movimiento hacia los tejidos (diapedesis) provocados por las bacterias mientras se combatía la infección. Sin embargo, a las 24 h el número de hemocitos fue mayor que el del control mientras que su diámetro fue menor. Al parecer la hematopoyesis fue inducida por la infección bacteriana, como puede apreciarse por la variación en el número y el diámetro de los hemocitos. Las enzimas con mayor actividad, leucil arylamidasa y esterasa, son las responsables del cambio en la conformación de la pared celular de las bacterias. Asimismo, la lisozima actúa destruyendo la pared celular bacteriana, provocando que la degradación bacteriana sea más fácil. La mayor actividad de lisozima en plasma sugiere que ésta fue liberada por los hemocitos al plasma durante el estrés patológico causado por V. alginolyticus. Las concentraciones de Iípidos y carbohidratos no mostraron una relación aparente con la respuesta inmunológica. Tampoco se encontraron daños aparentes en los diferentes tejidos analizados.
Descripción : IMPRESO Y PDF
URI : http://www.repositoriodigital.ipn.mx/handle/123456789/14428
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